其他皮膚病醫(yī)院國營
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(1)新鮮抗凝血標本,用比重1.077的淋巴細胞分離液作密度梯度分離,取淋巴細胞層細胞離心涂片,空氣干燥。或不作細胞分離,直接涂片。
(2)涂片用過氧化氫-甲醇液于4℃下固定20~30min,以阻斷細胞的內源性過氧化酶。
(3)涂片在0.1mol/L磷酸鹽緩沖液中浸泡15min,滴加正常兔血清,以減少抗體非特異性結合。
(4)滴加兔抗牛TdT抗體,37℃保溫30min。
(5)滴加羊抗兔IgG抗體,37℃保溫30min。
(6)滴加PAP免疫復合物,37℃保溫30min。
(7)將涂片浸入DAB溶液,室溫作用5~10min。
(8)水洗5min,干后鏡檢,或用哈氏蘇木素染液復染胞核10min。
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